荧光显微镜使用说明及荧光显微镜的使用注意事项

http://www.microimage.com.cn(2011-07-28 18:11:06)

荧光显微镜使用说明及荧光显微镜的使用注意事项关键字:荧光显微镜使用说明荧光显微镜的使用注意事项荧光显微镜是光学显微镜中特殊的一种,和普通光学显微镜不同。目前许多新兴生物研究领域应用到荧光显微镜,如基因原位杂交(FISH)等等。以下说说荧光显微镜使用说...

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使用说明

荧光显微镜是光学显微镜中特殊的一种,和普通光学显微镜不同。

目前许多新兴生物研究领域应用到荧光显微镜,如基因原位杂交(FISH)等等。以下说说荧光显微镜使用说明及荧光显微镜的使用注意事项

(1)严格按照荧光显微镜厂家说明书要求进行操作,不要随意改变程序。

(2) 观察对象必须是可自发荧光或已被染色的标本。

(3)应在暗室中进行检查。进入暗室后,接上电源,点燃超高压汞灯5~15min,待光源发出强光稳定后,眼睛完全适应暗室,再开始观察标本。

(4)载玻片、盖玻片及镜油应不含自发荧光杂质,载玻片的厚度应在0.8~1.2mm之间,太厚可吸收较多的光,并且不能使激发光在标本平面上聚焦。载玻片必须光洁,厚度均匀,无油渍或划痕。盖玻片厚度应在0.17mm左右。

(5)防止紫外线对眼睛的损害,在调整光源时应戴上防护眼镜。

(6)选用效果最好的滤光片组。

(7)选用效果最好的滤光片组。

(8)检查时间每次以1~2h为宜,超过90min,超高压汞灯发光强度逐渐下降,荧光减弱;标本受紫外线照射3~5min后,荧光也明显减弱;所以,最多不得超过2~3h。

(9)荧光标本一般不能长久保存,若持续长时间照射(尤其是紫外线)易很快褪色。因此,如有条件则应先照相存档,再仔细观察标本。

(10)荧光显微镜光源寿命有限,启动高压汞灯后,不得在15min内将其关闭,一经关闭,必须待汞灯冷却后方可再开启。严禁频繁开闭,否则,会大大降低汞灯的寿命。标本应集中检查,以节省时间,保护光源。天热时,应加电扇散热降温,新换灯泡应从开始就记录使用时间。灯熄灭后欲再用时,须待灯泡充分冷却后才能点燃。一天中应避免数次点燃光源。

(11)标本染色后立即观察,因时间久了荧光会逐渐减弱。若将标本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存,可延缓荧光减弱时间,防止封裱剂蒸发。 (12)若暂不观察标本时,可拉过阻光光帘阻挡光线。这样,既可避免对标本不必要的长时间照射,又减少了开闭汞灯的频率和次数。

(13)荧光亮度的判断标准:一般分为四级,即“一&rdquomdash;无或可见微弱荧光。“+&rdquomdash;仅能见明确可见的荧光。“++&rdquomdash;可见有明亮的荧光。“+++&rdquomdash;可见耀眼的荧光。

(14)较长时间观察荧光标本时,一定要戴能阻挡紫外光的护目镜,加强对眼睛的保护。在未加入阻断滤光片前不要用眼直接观察,否则会损伤眼睛。

a. 激发光长时间的照射,会发生荧光的衰减和淬灭现象,因此尽可能缩短观察时间,暂时不观察时,应用挡板遮盖激发光。

c. 荧光几乎都较弱,应在较暗的室内进行。

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