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滨松第四届成像大赛作品:神经细胞膜电位变化的荧光成像
发布时间:2017-02-16        浏览次数:395        返回列表
 所用相机:Flash4.0 V3         
成像方式:宽场荧光 
应用描述:电压敏感的荧光蛋白定位于细胞膜上,与离子通道相偶联。神经细胞的膜电位变化会引起该蛋白荧光强弱的变化,从而使膜电位“可视化”。传统的CCD或普通高速CMOS相机由于灵敏度和帧速上限太低,往往和肉眼观察一样,分辨不出荧光信号的快速变化;该实验使用滨松Flash4.0 V3,在USB 3.0的连接方式下将帧速提高至1,0000 fps,使1 ms内的荧光变化也能够清晰的呈现出来。 
该实验使用胚胎期电转质粒的方式,让小鼠脑部特定类群的神经元表达电压敏感的荧光蛋白ASAP1,配合膜片钳系统对脑片中被标记的神经元给予电刺激,使其膜电位产生变化;同时利用Flash4.0 V3的超高速成像能力,捕捉荧光信号的实时变化。 
         
1. 在512*128的ROI(region of interst)下,可以用1600 fps的帧速记录单个神经细胞胞体的膜电位变化。 
    
 
2. 在512*8的ROI下,其帧速可以达到10000 fps。在该尺度下可以达到每个电位的Spike记录5-10个采样数据点,且其信号的信噪比仍然很好。 
 
 
3. 成像系统配置:Olympus BX51WI + Hamamatsu Flash4.0 V3